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实验介绍
条件性位置偏爱(Conditioned place preference)是一种根据条件反射原理建立用来评价药物强化效应的实验方法。
操作准备
(1)动物准备:性别,周数尽量保持一致。室温(23±2℃),光照12h(18:00-6:00),黑暗12h(6:00-18:00),自由饮水进食饲养,预适应环境一周后,(所有实验均于6:00-18:00进行)。选择合适动物,随机分配;
(2)器材准备:三箱体装置则有中间通道室通道一般较两侧箱体小,颜色、花纹、质地与两侧箱体不同或各取两侧箱体的一半构成。三箱体较两箱体的优点在于可以避免将实验动物放置入箱体时头的朝向给动物以暗示的问题。分为倾向性和非倾向性,非倾向性需要在预实验阶段调节至动物对两箱无偏好,进入两边的次数和时间基本相等。倾向性不需要考虑动物对两边的偏好,通过预实验确定动物偏好,根据实验目的设计给药位置。
操作步骤
1、实验D1每只大鼠不给药物和生理盐水抽出CPP箱的隔板将大鼠放入中间箱中使其自由穿梭于黑白箱中15min,检测其在各箱中停留的时间(即基础值)。选择非偏爱箱为伴药箱;
2、在条件化训练阶段 (d2-7)偏爱箱的两室用挡板隔开受试动物于每天早上 8∶00注射药物,下午 4∶00注射生理盐水。(可以同一天间隔数小时,或者隔天注射)。如果设置空白对照组,则同样时间将药物换成生理盐水,其他不变一样训练6天;
3、大鼠给药后立即放入伴药箱,给生理盐水后立即放入非伴药箱停留45min。对照组上下午均给予等体积的生理盐水然后也放入伴药箱或非伴药箱停留45min。每天循环一次,同一时间进行;
4、在实验d8(检测偏爱形成)抽出CPP箱的隔板将大鼠放入中间箱使其自由穿梭于黑白箱中 15min记录下大鼠在伴药箱和非伴药箱中各自停留的时间;
5、在实验d18(检测偏爱消退)抽出CPP箱的隔板将大鼠放入中间箱使其自由穿梭于黑白箱中 15min记录下大鼠在伴药箱和非伴药箱中各自停留的时间。
数据分析
具有成瘾性潜能的药物作用于机体后能产生奖赏效应。通过训练使动物把药物的奖赏效应与某一特定环境刺激联系起来,环境成为奖赏的二次刺激,动物会倾向于停留在曾经获得的药物奖赏的环境中;
记录第一天,第八天,第18天动物在伴药箱和非伴药箱的各自停留时间和进箱次数,根据情况选择分析。停留时间长的一侧被视为偏爱侧,停留时间短的一侧为厌恶侧。对结果的统计可与进行条件训练之前预实验的结果进行自身对照,也可以与设置的对照组进行比较;
自身对照:第八天与第一天相比动物如果在伴药箱停留时间变长,进入次数变多则CPP形成。第18天与第八天相比动物在伴药箱侧停留时间明显减少则证明CPP消退。
注意事项
1、光线昏暗柔和并避免直射入箱体;
2、实验室白噪音以屏蔽室外的噪音减少声音影响;
3不同药物和给药方式,训练时停留时间可能需要根据情况调整;
4、根据不同研究需要,选择组内对照和组间对照,也可两种都做更加全面;
5、第18天的偏爱消退根据研究需要,如果只测试CPP的形成,可不做;
6、CPP 行为指标也有多种计量方法。单纯的组间设计忽略了不同处理组间的内在差异将CPP定义为实验组动物在给药侧与对照组在对应环境中停留时间的差异;如果选用组内设计可以不进行前测直接把条件化训练后动物在测验时盐水侧环境与药物侧环境停留时间差异作为指标但忽略了动物非条件性偏爱对实验结果所造成的影响。相比之下较为科学的方法是不同的实验处理作为组间变量训练前测试与训练后测试作为组内变量采用混合设计对实验数据进行重复测量的多因素方差分析。
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