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实验介绍
评估其长期学习记忆能力,通常记忆能力越好的动物会更多地探索新异臂,表现出对新异环境的偏好。
操作准备
(1)动物准备:性别,周数尽量保持一致。室温(23±2℃),光照12h(18:00-6:00),黑暗12h(6:00-18:00),自由饮水进食饲养,预适应环境一周后,取材质量(20±2)g小鼠正式进行实验(所有实验均于6:00-18:00进行)。选择合适小鼠,随机分配;
(2)器材准备:Y迷宫由中央向四周放射性伸出的3个臂组成,每个臂长30cm,宽5cm。应用视觉标志物,在三个臂的末端,粘贴不同形状的视觉标记物帮助小鼠区别各个臂。实验前清洁迷宫,确保每个臂内部无异味和残留物。三个臂被随机设为:起始臂(start arm)、其他臂(other arm)和新异臂(new arm),三臂交汇处各有一个可移动的隔板。
操作步骤
1、整个实验在安静环境下进行,包括训练阶段和测试阶段2个过程。训练阶段用隔板遮挡新异臂,小鼠均由起始臂放入,在起始臂和其他臂之间自由活动10 min,每只小鼠放入前,均用体积分数75%乙醇擦拭臂内壁并自然风干,训练结束后放回饲养笼,1 h后进行测试;
2、测试阶段取掉新异臂的隔板,其他操作同训练阶段,让小鼠在3个臂中自由活动,录像并采集数据5 min。
数据分析
1、需要记录的数据有,动物进入各臂活动的次数(Frequency)、距离(Distance)以及停留时间(duration),同时记录实验动物运动的总距离、总时间等重要信息。(可处理列表的信息:新异臂内探索距离占比% 、新异臂内探索时间占比% 、进入新异臂的次数占比%);
2、如果小鼠的空间参考记忆完整,则会更加频繁地探索新异臂;
3、如果小鼠的空间参考能力受损,则探索三个臂的次数、距离及停留时间无差异,提示海马功能受损。
注意事项
1、三个臂确定以后不能更改;
2、实验前小鼠提前进入场地适应;
3、每次试验后需要清理场地;
4、清理后可能移动箱子,看情况使用软件校准。
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