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实验介绍
强迫游泳实验以游泳的不动时间为主要指标检测动物的绝望行为,是抗抑郁药物初筛以及检测模型动物是否出现“抑郁样”行为的常用检测实验。
操作准备
(1)动物准备:性别,周数尽量保持一致。室温(23±2℃),光照12h(18:00-6:00),黑暗12h(6:00-18:00),自由饮水进食饲养,预适应环境一周后,(所有实验均于6:00-18:00进行)。选择合适动物,随机分配。提前一天放入实验场地适应,单只饲养,自由饮水进食;
(2)器材准备:小鼠强迫性游泳实验:高20cm直径10cm的圆柱型玻璃缸中,缸中水深10cm水温23±2℃。大鼠强迫性游泳实验:大鼠放入内径20cm,高40cm的玻璃圆缸中缸中水深24cm水温25±2℃。
操作步骤
小鼠强迫性游泳实验:测试前30min-1h给药。将小鼠放入玻璃缸中,每缸1只,如果多只同时进行,中间需要用不透明挡板隔开。放入后开始录像,一共录制6min,2min后开始观察,观察持续4min。累计此4min内小鼠在水中不动时间(停止挣扎或呈漂浮状态仅有细小的肢体运动以保持头部浮在水面的持续时间);
大鼠强迫性游泳实验:测试前30min-1h给药。大鼠放入玻璃圆缸中,每缸1只,如果多只同时,需要用进行不透明隔板隔开。正式实验前一天每只大鼠预游15min,随后取出于灯下擦干放入笼中。24h后正式进行测试,大鼠放入水缸中立即连续观察5min累计大鼠在水中不动时间(停止挣扎呈漂浮直立状态仅有偶尔的肢体运动以保持头部浮在水面的持续时间)。为尽量避免观察的主观性给药与观察分别由不同的实验者进行。每只大鼠仅实验1次。
数据分析
1、不动( immobility):动物在水中停止挣扎,呈漂浮状态,仅有轻微的肢体运动以保持头部浮在水面。不动时间越长表明抑郁程度越重。抑郁行为判断标准:不动时间与对照组相比显著性增加(P<0.05);
2.游泳(swimming):动物进行流畅、协调的运动,动物四肢始终在水面以下。游泳时间和游泳距离越少,表明抑郁程度越重;
3.攀爬( climbing):动物四肢强有力伸出水面,并沿测试箱壁做剧烈的上下动作。攀爬时间越少,表明动物抑郁程度越重。
注意事项
1、水深应根据动物体重进行调整,动物尾巴与测试箱底面保持一定距离;
2、每只动物实验完需要换水,每只动物只进行一次测试;
3、如同时进行多只动物实验,每两只动物间应用不透明挡板隔开;
4、大鼠强迫游泳实验,应在实验前一天预游,24h后进行强迫游泳实验。小鼠强迫游泳实验,只在检测当天进行;
5、计算动物绝望状态的行为,通常以动物的后肢是否活动为判断依据。6.受水温影响较大,冷水较容易出现不动状态,在温度较高水中出现较晚。