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一、矽肺模型制备方法
1、灭菌后的标准二氧化硅粉尘(约1-5 μm)混悬于无菌PBS或生理盐水;
2、将适龄SPF级C57BL/6雄性小鼠(约10-12w)经异氟烷精准诱导麻醉后,快速取出横;
3、仰于手掌心,头朝向大拇指(非操作移液器的手),用大拇指指尖抵住小鼠下颌尖防止小鼠吞咽和张嘴呼吸;
4、另一只手用移液器(100 μL)快速吸取混匀后的二氧化硅粉尘悬液60-80μL(根据造模需要);
5、移液器枪头对准小鼠单侧鼻翼,在小鼠呼吸间隔时快速滴上,待吸入后迅速滴上下一滴直至滴完;
6、持移液器手放下移液器后,用食指或大拇指指尖快速实施胸腔按压,促进小鼠呼吸和悬液吸入,直至小鼠完全苏醒;
7、将小鼠置于笼内监护,实施下一只小鼠造模;/8、若采用反复多次暴露,建议采用60μL体系,隔天暴露。
二、模型评价
2.1小鼠个体表型评价
生活质量评分,小鼠行为学测试,小鼠呼吸功能测试(全体积描记),小鼠CT/PET-CT。
2.2 病理表型评价
H&E染色,Masson染色,天狼猩红染色,免疫组化(IHC)染色,免疫荧光(IF)染色等。
2.3 分子检测评价
aSMA,COL-I,FN,TGF-β,羟脯氨酸等。
2.4 离体肺脏评价
Micro-CT,透明组织三维成像。
三、模型应用
营养预防研究、期前诊断分子早筛研究、影像学研究、分子机制研究、药物开发研究、康复研究等。

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